Ribosomal Protein L8 Plasmide Double Nickase (m): sc-424161-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Ribosomal Protein L8 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Ribosomal Protein L8 Double Nickase Plasmid (m) e il Ribosomal Protein L8 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Rpl8. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Ribosomal Protein L8 Plasmide Double Nickase (m) | sc-424161-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Ribosomal Protein L8 Plasmide Double Nickase (m2) | sc-424161-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Mouse Rpl8 codifica la proteina ribosomiale L8, un componente fondamentale della subunità ribosomiale grande 60S che sostiene la biogenesi dei ribosomi e un’efficiente elongazione della traduzione. Come parte del macchinario ribosomiale, RPL8 contribuisce ai programmi di proteostasi che si integrano con il controllo della traduzione regolato da mTOR e con la risposta cellulare alla disponibilità di nutrienti e allo stress. Alterazioni delle proteine ribosomiali possono compromettere la sintesi proteica globale e attivare vie di stress nucleolare che intersecano la regolazione del ciclo cellulare e la segnalazione di p53. Poiché la produttività ribosomiale influenza proliferazione, differenziamento e adattamento allo stress, Rpl8 è spesso studiato in contesti in cui la capacità di traduzione e l’integrità dei ribosomi determinano fenotipi rilevanti per la malattia.
Ribosomal Protein L8 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Rpl8 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Rpl8. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Rpl8. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Rpl8 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.