RAET1G Plasmide Double Nickase (h): sc-410520-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- RAET1G Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il RAET1G Double Nickase Plasmid (h) e il RAET1G Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira RAET1G. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
RAET1G Plasmide Double Nickase (h) | sc-410520-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
RAET1G Plasmide Double Nickase (h2) | sc-410520-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RAET1G codifica un ligando di NKG2D espresso sulla superficie cellulare appartenente alla famiglia RAET1/ULBP, indotto dallo stress cellulare, che si lega a NKG2D sulle cellule NK e su sottopopolazioni di cellule T favorendo il riconoscimento immunitario. La sua espressione collega le risposte al danno del DNA, la segnalazione infiammatoria e i processi di traffico di membrana alla soglia di attivazione dei linfociti citotossici. Una deregolazione di RAET1G è stata associata a un’alterata sorveglianza immunitaria nel cancro e a microambienti infiammatori, in cui l’induzione di ligandi da stress può modulare l’immunità tissutale. Di conseguenza, RAET1G è ampiamente studiato nei circuiti che controllano l’immunogenicità indotta da stress, le interazioni tumore–sistema immunitario e la regolazione delle risposte dei linfociti con caratteristiche innate.
RAET1G Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus RAET1G nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di RAET1G. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di RAET1G. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con RAET1G interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.