PRMT3 Plasmide Double Nickase (h): sc-406688-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- PRMT3 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il PRMT3 Double Nickase Plasmid (h) e il PRMT3 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira PRMT3. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
PRMT3 Plasmide Double Nickase (h) | sc-406688-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
PRMT3 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-406688-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PRMT3 codifica la proteina arginina metiltransferasi 3, una PRMT di tipo I citosolica che catalizza la dimetilazione asimmetrica dei residui di arginina sui substrati proteici, modulando le interazioni proteina–proteina e la regolazione post-trascrizionale. PRMT3 è implicata nella biogenesi dei ribosomi e nel controllo della traduzione attraverso la metilazione di fattori ribosomiali e associati all’RNA, collegandola alla proteostasi e ai programmi di crescita cellulare. Modulando la segnalazione e il metabolismo dell’RNA, PRMT3 può influenzare le risposte allo stress e gli stati di differenziamento in modo dipendente dal contesto. Alterazioni dell’espressione o dell’attività di PRMT3 sono state associate a proliferazione deregolata e a fenotipi metabolici riportati in diversi modelli rilevanti per la malattia, a supporto del suo studio nella ricerca meccanicistica.
PRMT3 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus PRMT3 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di PRMT3. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di PRMT3. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con PRMT3 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.