PRMT2 Plasmide Double Nickase (h): sc-405107-NIC

PRMT2 codifica una metiltransferasi di tipo I per l’arginina delle proteine, che catalizza la dimetilazione asimmetrica di residui di arginina sugli istoni e su altre proteine nucleari, modellando la struttura della cromatina e l’output trascrizionale. Attraverso la modulazione di programmi regolatori legati all’RNA polimerasi II e di interazioni proteina–proteina dipendenti dalla metilazione, PRMT2 contribuisce al controllo della progressione del ciclo cellulare, della differenziazione e delle risposte cellulari allo stress. PRMT2 è stato implicato nel crosstalk con la segnalazione dei recettori ormonali e con reti trascrizionali associate a NF-κB, collegando la sua attività a una regolazione infiammatoria e metabolica dipendente dal contesto. Un’espressione o un’attività deregolate di PRMT2 sono state associate a stati trascrizionali oncogenici e ad altri fenotipi complessi di malattia, rendendolo un nodo utile per studi meccanicistici della regolazione epigenetica.

PRMT2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus PRMT2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di PRMT2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di PRMT2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.

Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con PRMT2 interrotto.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.