PDIR CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-405741

개요

PDIA5는 인간 단백질 디설파이드 이성질화효소 관련 단백질인 PDIR을 암호화하며, PDIR은 소포체(ER)에 상주하는 산화환원효소로서 산화적 단백질 접힘과 이황화 결합 이성질화를 지원합니다. 단백질 디설파이드 이성질화효소(PDI) 패밀리의 일원으로서 PDIR은 분비 단백질 및 막 단백질의 성숙을 촉진하고, 미접힘 단백질 반응(UPR) 동안 작동하는 샤페론 네트워크와 협력함으로써 ER 단백질 항상성(프로테오스타시스)에 기여합니다. PDIA5의 활성은 ER 품질 관리, 산화환원 항상성, 그리고 ER-연관 분해(ERAD)와 맞물려 있으며, 이러한 과정들은 암, 대사 스트레스, 신경퇴행성 질환 환경에서 흔히 재편됩니다. PDI 계열 기능의 변화는 ER 스트레스 신호의 증가와 분비 경로 용량의 변화와 자주 연관되므로, PDIA5는 산화환원 의존적 접힘의 기전을 연구하는 데 유용한 핵심 지점이 됩니다.

PDIR CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 PDIA5 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 PDIA5 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 PDIA5의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 PDIR 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 PDIR 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 PDIA5 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• PDIR 기능에 중요한 PDIA5 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 PDIA5 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• PDIR CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 PDIR CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 PDIA5 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  PDIR HDR 플라스미드 (h) 및 PDIR HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 PDIA5 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 PDIA5 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.