Plasmide Double Nickase (h) NAT-11: sc-413259-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) NAT-11 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide NAT-11 Double Nickase (h) et le plasmide NAT-11 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant NAA40. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) NAT-11 | sc-413259-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) NAT-11 | sc-413259-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
NAA40 code l’acétyltransférase N-terminale NAT-11, une enzyme qui catalyse l’acétylation Nα de l’histone H4 en position Ser1 et contribue à façonner l’architecture de la chromatine ainsi que la production transcriptionnelle. En régulant les états de modification des histones, NAT-11 participe au contrôle épigénétique de la progression du cycle cellulaire, des processus dépendants de l’ADN et du maintien de la stabilité du génome. La perturbation de l’activité de NAA40 a été associée à des programmes d’expression génique modifiés et à des changements de la capacité proliférative, ce qui en fait une cible pertinente pour l’étude de la signalisation et des réponses au stress dépendantes de la chromatine. Comme l’acétylation N-terminale des histones s’inscrit dans des réseaux épigénétiques plus larges, NAA40 est fréquemment étudié dans des contextes où une dérégulation de la chromatine s’accompagne de phénotypes associés à des maladies.
NAT-11 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus NAA40 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de NAA40. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de NAA40. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de NAA40.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.