LXR alpha/NR1H3 Plasmide Double Nickase (m): sc-423616-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- LXR alpha/NR1H3 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il LXR alpha/NR1H3 Double Nickase Plasmid (m) e il LXR alpha/NR1H3 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Nr1h3. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
LXR alpha/NR1H3 Plasmide Double Nickase (m) | sc-423616-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
LXR alpha/NR1H3 Plasmide Double Nickase (m2) | sc-423616-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Nr1h3 codifica per il recettore X del fegato alfa (LXRα/NR1H3), un recettore nucleare attivato da ligando che eterodimerizza con RXR per regolare programmi trascrizionali che controllano l’efflusso del colesterolo, il metabolismo degli acidi biliari e la sintesi degli acidi grassi. LXRα integra il rilevamento degli ossisteroli con la gestione delle lipoproteine modulando bersagli coinvolti nel trasporto inverso del colesterolo e nell’omeostasi degli steroli, e interagisce con la segnalazione infiammatoria nei macrofagi attraverso meccanismi di transrepressione. Nei modelli murini, l’alterazione dell’attività di Nr1h3 è stata utilizzata per studiare la dislipidemia, la biologia delle cellule schiumose rilevante per l’aterosclerosi, la steatosi epatica e l’infiammazione metabolica. Queste funzioni rendono NR1H3 un nodo chiave per indagare il crosstalk immunometabolico tra fegato, tessuto adiposo e compartimenti dell’immunità innata.
LXR alpha/NR1H3 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Nr1h3 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Nr1h3. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Nr1h3. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Nr1h3 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.