Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
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JunD Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-400713
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- JunD Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico JunD, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: JunD Antibody (D-9): sc-271938
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
JunD Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h) | sc-400713 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
JUND codifica JunD, un fattore di trascrizione di tipo basic leucine zipper (bZIP) della famiglia AP-1 che dimerizza con le proteine JUN e FOS per regolare l’espressione genica in risposta agli stimoli. JunD integra la segnalazione MAPK e i segnali infiammatori per controllare la progressione del ciclo cellulare, la differenziazione, le risposte allo stress ossidativo e l’apoptosi, modulando trascrizionalmente promotori ed enhancer. Contribuisce ai programmi della cromatina e della trascrizione a valle di citochine e fattori di crescita, influenzando processi quali il rimodellamento della matrice extracellulare e la segnalazione immunitaria. Un’attività AP-1 disregolata che coinvolge JunD è stata associata ad alterazioni della proliferazione, dell’adattamento allo stress e a fenotipi correlati ai tumori in diversi contesti tissutali, a supporto della sua rilevanza per studi meccanicistici delle malattie.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO JunD (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene JUND in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del JUND insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto JUND a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina JunD.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di JUND per lo studio della segnalazione di JunD, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni JUND critici per la funzione di JunD
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di JUND per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal JunD CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal JunD CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus JUND. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal JunD Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR JunD (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia JUND per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio JUND definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.