Plasmide Double Nickase (h) JMJD2D: sc-404743-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) JMJD2D correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide JMJD2D Double Nickase (h) et le plasmide JMJD2D Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant KDM4D. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) JMJD2D | sc-404743-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) JMJD2D | sc-404743-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
KDM4D (JMJD2D) humain code une déméthylase des lysines d’histones contenant un domaine Jumonji C (JmjC), qui élimine principalement les marques répressives H3K9me2/3 afin de moduler l’accessibilité de la chromatine et les programmes transcriptionnels. En remodelant les états épigénétiques locaux, JMJD2D influence les réponses aux dommages de l’ADN, la progression du cycle cellulaire et la dynamique de la chromatine associée à la réplication, en s’intégrant à des voies qui coordonnent la stabilité du génome et l’occupation des facteurs de transcription. Une régulation altérée de KDM4D a été associée au remodelage épigénétique aberrant observé dans des réseaux transcriptionnels liés au cancer ainsi que dans d’autres troubles impliquant une dérégulation des modifications de la chromatine. En tant que régulateur épigénétique modèle, JMJD2D est fréquemment étudiée pour comprendre comment la déméthylation des histones affecte l’expression génique, la structure de la chromatine et la signalisation en réponse au stress.
JMJD2D Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus KDM4D dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de KDM4D. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de KDM4D. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de KDM4D.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.