JMJD2D Plasmide Double Nickase (h): sc-404743-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- JMJD2D Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il JMJD2D Double Nickase Plasmid (h) e il JMJD2D Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira KDM4D. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
JMJD2D Plasmide Double Nickase (h) | sc-404743-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
JMJD2D Plasmide Double Nickase (h2) | sc-404743-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene umano KDM4D (JMJD2D) codifica una demetilasi delle lisine degli istoni contenente il dominio Jumonji C (JmjC), che rimuove principalmente i segni repressivi H3K9me2/3 per modulare l’accessibilità della cromatina e i programmi trascrizionali. Rimodellando gli stati epigenetici locali, JMJD2D influenza le risposte al danno al DNA, la progressione del ciclo cellulare e le dinamiche della cromatina associate alla replicazione, interfacciandosi con vie che coordinano la stabilità del genoma e l’occupazione dei fattori di trascrizione. Una regolazione alterata di KDM4D è stata associata a un rimodellamento epigenetico aberrante osservato nelle reti trascrizionali legate al cancro e in altri disturbi connessi a una deregolazione delle modificazioni della cromatina. Come regolatore epigenetico modello, JMJD2D è spesso studiato per chiarire in che modo la demetilazione degli istoni influenzi l’espressione genica, la struttura della cromatina e la segnalazione in risposta allo stress.
JMJD2D Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus KDM4D nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di KDM4D. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di KDM4D. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con KDM4D interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.