Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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INCENP Plasmide Double Nickase (h): sc-403186-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- INCENP Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il INCENP Double Nickase Plasmid (h) e il INCENP Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira INCENP. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: INCENP Antibody (B-4): sc-376514
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
INCENP Plasmide Double Nickase (h) | sc-403186-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
INCENP Plasmide Double Nickase (h2) | sc-403186-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
INCENP (inner centromere protein) è un componente fondamentale del complesso dei passeggeri cromosomici (chromosomal passenger complex, CPC) insieme ad AURKB, BIRC5/Survivin e CDCA8, e coordina gli attacchi cinetocoro–microtubulo, la condensazione dei cromosomi e la citochinesi. Grazie al suo targeting al centromero interno e alla zona mediana del fuso, INCENP funge da impalcatura per la segnalazione di Aurora B, regolando la correzione degli errori e il checkpoint di assemblaggio del fuso durante la mitosi. La compromissione di INCENP altera la segregazione cromosomica e la formazione del corpo intermedio (midbody), portando ad aneuploidia e instabilità genomica. L’espressione alterata o l’attività deregolata del CPC è spesso studiata nel contesto della biologia delle malattie proliferative, del fallimento dei checkpoint mitotici e dei fenotipi di instabilità cromosomica.
INCENP Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus INCENP nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di INCENP. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di INCENP. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con INCENP interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.