Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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IL-1RI Plasmide Double Nickase (m): sc-421098-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- IL-1RI Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il IL-1RI Double Nickase Plasmid (m) e il IL-1RI Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Il1r1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: IL-1RI Antibody (H-8): sc-393998
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
IL-1RI Plasmide Double Nickase (m) | sc-421098-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IL-1RI Plasmide Double Nickase (m2) | sc-421098-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il1r1 codifica IL‑1RI murino, il principale recettore di segnalazione per interleuchina‑1α e interleuchina‑1β che avvia l’attivazione dell’immunità innata sulla superficie cellulare. Il legame del ligando recluta la proteina accessoria del recettore dell’IL‑1 e MyD88 per formare un complesso di segnalazione che innesca le cascate IRAK–TRAF6, culminando nell’attivazione di NF‑κB e MAPK e in un’ampia induzione di programmi genici infiammatori. Attraverso queste vie, IL‑1RI regola la produzione di citochine e chemochine, il reclutamento leucocitario, le risposte febbrili e il rimodellamento tissutale in molti tipi cellulari. Una segnalazione IL‑1RI deregolata è implicata in modelli di autoinfiammazione, patologia articolare di tipo artritico, neuroinfiammazione e infiammazione metabolica, rendendo Il1r1 un nodo chiave per la ricerca di immunologia meccanicistica.
IL-1RI Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Il1r1 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Il1r1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Il1r1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Il1r1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.