IL-1ra Plasmide Double Nickase (m): sc-421102-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- IL-1ra Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il IL-1ra Double Nickase Plasmid (m) e il IL-1ra Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Il1rn. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
IL-1ra Plasmide Double Nickase (m) | sc-421102-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IL-1ra Plasmide Double Nickase (m2) | sc-421102-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene murino Il1rn codifica l’antagonista del recettore dell’IL-1 (IL-1ra), un inibitore competitivo endogeno della segnalazione mediata da IL-1α/IL-1β che limita l’attivazione di IL-1R1 e delle vie a valle dipendenti da MyD88, NF-κB e MAPK. Contenendo i programmi trascrizionali pro-infiammatori e l’amplificazione delle citochine, l’IL-1ra contribuisce alla regolazione dell’attivazione delle cellule dell’immunità innata, al reclutamento leucocitario e all’omeostasi tissutale. Un’attività alterata di Il1rn viene utilizzata per modellare un’infiammazione deregolata, inclusi fenotipi simili all’artrite, patologie infiammatorie intestinali e infiammazione cutanea, offrendo un asse sperimentale maneggevole per studiare i feedback della rete citochinica e i meccanismi di risoluzione.
IL-1ra Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Il1rn nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Il1rn. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Il1rn. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Il1rn interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.