Plasmide Double Nickase (h) Hepsin: sc-405081-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Hepsin correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Hepsin Double Nickase (h) et le plasmide Hepsin Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant HPN. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Hepsin Antibody (2D5): sc-517056
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Hepsin | sc-405081-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Hepsin | sc-405081-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HPN code pour l’hepsine, une protéase à sérine transmembranaire de type II, enrichie à la surface cellulaire, où elle participe à la protéolyse péricellulaire, au remodelage de la matrice extracellulaire et à la régulation des interactions cellule–cellule et cellule–matrice. L’hepsine peut influencer la signalisation activée par les protéases et la disponibilité des facteurs de croissance en clivant des substrats extracellulaires, ce qui la relie à des voies façonnant la différenciation épithéliale, l’architecture tissulaire et les comportements invasifs. Une expression dérégulée de HPN et une activité altérée de l’hepsine ont été rapportées dans de multiples cancers épithéliaux, ce qui en fait un levier moléculaire utile pour étudier les réseaux de protéases associés aux tumeurs et le dialogue avec le microenvironnement. En recherche biomédicale, HPN est fréquemment étudié pour ses rôles dans les cascades de protéases ancrées à la membrane, la migration cellulaire et la protéostasie à la membrane plasmique.
Hepsin Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus HPN dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de HPN. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de HPN. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de HPN.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.