Haptoglobin Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401468-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- HaptoglobinO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Haptoglobin (h) e o Plasmídeo Double Nickase Haptoglobin (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para HP. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Haptoglobin α Anticorpo (C-8): sc-376893
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Haptoglobin Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401468-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Haptoglobin Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401468-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HP codifica a haptoglobina, uma glicoproteína secretada de fase aguda que se liga à hemoglobina livre com elevada afinidade para limitar o dano oxidativo impulsionado pelo heme e preservar a biodisponibilidade de óxido nítrico vascular. O complexo haptoglobina–hemoglobina é removido principalmente por macrófagos que expressam CD163, ligando o HP aos processos de sequestro de heme, manuseio do ferro e programas de resolução da imunidade inata durante lesão tecidual e inflamação. Por meio desses mecanismos, o HP se relaciona com o controle do estresse oxidativo, a polarização de macrófagos e a sinalização inflamatória associada ao complemento. A expressão ou o genótipo alterados de HP têm sido estudados em contextos de hemólise e inflamação crônica, incluindo patologias cardiometabólicas e vasculares, nas quais a carga oxidativa e a ativação imune são variáveis experimentais centrais.
Haptoglobin O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus HP em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de HP. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função HP. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com HP interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.