GPRC5C Plasmide Double Nickase (h): sc-406870-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- GPRC5C Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il GPRC5C Double Nickase Plasmid (h) e il GPRC5C Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira GPRC5C. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
GPRC5C Plasmide Double Nickase (h) | sc-406870-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GPRC5C Plasmide Double Nickase (h2) | sc-406870-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GPRC5C (recettore accoppiato a proteine G di classe C, gruppo 5, membro C) è una proteina transmembrana simile a un GPCR orfano, implicata nella regolazione della differenziazione epiteliale e nella trasduzione del segnale dipendente dal contesto. È collegata a processi a valle della segnalazione mediata da recettori, inclusa la modulazione della via MAPK e di altre vie che influenzano proliferazione, adesione e risposte cellulari allo stress. L’espressione di GPRC5C varia tra i diversi tipi di tessuto e, in molte condizioni patologiche, è stata riportata come soggetta a cambiamenti, a supporto del suo impiego come “maniglia” molecolare per studiare stati di segnalazione alterati. L’analisi sperimentale di GPRC5C aiuta a chiarire come le reti correlate ai GPCR modellino l’identità cellulare e le risposte adattative in modelli cellulari umani.
GPRC5C Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus GPRC5C nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di GPRC5C. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di GPRC5C. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con GPRC5C interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.