Gas1 Plasmide Double Nickase (h): sc-404384-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Gas1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Gas1 Double Nickase Plasmid (h) e il Gas1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira GAS1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Gas1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-404384-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Gas1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-404384-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Growth arrest specific 1 (GAS1) codifica Gas1, una proteina di superficie cellulare ancorata tramite glicosilfosfatidilinositolo (GPI) che modula la segnalazione dello sviluppo e il controllo del ciclo cellulare. Gas1 può influenzare l’attività della via di Hedgehog agendo sulle interazioni ligando–recettore e sulla propagazione del segnale alla membrana plasmatica, collegando segnali extracellulari a programmi trascrizionali che regolano proliferazione e differenziamento. Per questi ruoli, GAS1 è comunemente studiato in contesti quali il patterning embrionale, lo sviluppo del sistema nervoso e l’omeostasi tissutale. Alterazioni dell’espressione o della segnalazione di GAS1 sono state associate a un controllo della crescita deregolato in ambito oncologico e a fenotipi congeniti dello sviluppo, rendendolo rilevante per studi meccanicistici sulle perturbazioni delle vie di segnalazione.
Gas1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus GAS1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di GAS1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di GAS1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con GAS1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.