Plasmide Double Nickase (h) Gas1: sc-404384-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Gas1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Gas1 Double Nickase (h) et le plasmide Gas1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant GAS1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Gas1 | sc-404384-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Gas1 | sc-404384-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Growth arrest specific 1 (GAS1) code Gas1, une protéine de surface cellulaire ancrée par glycosylphosphatidylinositol (GPI) qui module la signalisation du développement et le contrôle du cycle cellulaire. Gas1 peut influencer l’activité de la voie Hedgehog en affectant les interactions ligand–récepteur et la propagation du signal au niveau de la membrane plasmique, reliant des signaux extracellulaires à des programmes transcriptionnels qui gouvernent la prolifération et la différenciation. De ce fait, GAS1 est couramment étudié dans des contextes tels que la mise en place des structures embryonnaires, le neurodéveloppement et l’homéostasie tissulaire. Une expression ou une signalisation de GAS1 altérée a été associée à une dérégulation du contrôle de la croissance en biologie du cancer ainsi qu’à des phénotypes développementaux congénitaux, ce qui en fait une cible pertinente pour des études mécanistiques des perturbations de voie.
Gas1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus GAS1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de GAS1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de GAS1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de GAS1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.