gametogenetin Plasmide Double Nickase (m): sc-434015-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- gametogenetin Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il gametogenetin Double Nickase Plasmid (m) e il gametogenetin Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Ggn. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
gametogenetin Plasmide Double Nickase (m) | sc-434015-NIC | 20 µg | $410.00 |
Il gene murino **Ggn** codifica la gametogenetina, una proteina arricchita nelle cellule germinali implicata nella spermatogenesi e nella differenziazione dei gameti nelle fasi tardive, con una marcata espressione nel testicolo. La gametogenetina è stata associata a eventi di organizzazione nucleare e del citoscheletro che accompagnano la progressione meiotica e la spermiogenesi, inclusi il rimodellamento della cromatina e la maturazione strutturale degli spermatozoi in sviluppo. La perturbazione di **Ggn** è quindi rilevante per studiare le vie che regolano lo sviluppo delle cellule germinali, l’integrità del genoma durante la meiosi e i fenotipi associati alla fertilità. Questi processi si intrecciano con aspetti più ampi della biologia riproduttiva e dei programmi di sviluppo, spesso alterati in modelli di infertilità maschile e disfunzione testicolare.
gametogenetin Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Ggn nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Ggn. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Ggn. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Ggn interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.