FXYD2 Plasmide Double Nickase (h): sc-404044-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- FXYD2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il FXYD2 Double Nickase Plasmid (h) e il FXYD2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira FXYD2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
FXYD2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-404044-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
FXYD2 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-404044-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FXYD2 codifica una piccola proteina di membrana a singolo passaggio che funge da subunità regolatoria tessuto-specifica della Na⁺/K⁺-ATPasi, modulando la cinetica della pompa e l’omeostasi ionica. Nel rene umano e in altri epiteli, FXYD2 contribuisce alla gestione transepiteliale del sodio e all’equilibrio osmotico cellulare, collegandosi a processi più ampi come la regolazione del potenziale di membrana e il trasporto degli elettroliti. Alterazioni dell’espressione o della funzione di FXYD2 sono state associate alla fisiologia dei tubuli renali e a fenotipi di malattie tubulointerstiziali ereditarie, e sono state esplorate anche in contesti di risposta allo stress metabolico. Poiché l’attività della Na⁺/K⁺-ATPasi influenza la segnalazione a valle e l’energetica cellulare, FXYD2 rappresenta un bersaglio utile per studiare vie dipendenti dal trasporto ionico nella biologia epiteliale.
FXYD2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus FXYD2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di FXYD2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di FXYD2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con FXYD2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.