Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Fra2 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-420403
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Fra2 Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico Fra2, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Fra2 Antibody (G-5): sc-166102
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Fra2 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m) | sc-420403 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
Fosl2 codifica Fra2 (antigene 2 simile a FOS), un fattore di trascrizione bZIP (basic leucine zipper) che dimerizza con le proteine JUN per formare complessi AP-1, i quali controllano l’espressione genica dipendente dagli stimoli. Nelle cellule di topo, Fra2 integra i segnali MAPK/ERK e JNK per regolare programmi legati a proliferazione, differenziamento, rimodellamento della matrice extracellulare e risposte allo stress. L’attività di Fra2 influenza le decisioni di destino cellulare nei compartimenti osseo e immunitario e modula circuiti trascrizionali infiammatori. Una segnalazione AP-1/Fra2 deregolata è stata associata a rimodellamento patologico e a stati trascrizionali oncogenici, rendendo Fosl2 un nodo utile per studi meccanicistici sul controllo trascrizionale specifico del contesto.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO Fra2 (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Fosl2 in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Fosl2 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Fosl2 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina Fra2.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Fosl2 per lo studio della segnalazione di Fra2, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni Fosl2 critici per la funzione di Fra2
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Fosl2 per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal Fra2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal Fra2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Fosl2. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal Fra2 Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR Fra2 (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Fosl2 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Fosl2 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.