FPR2 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-420405

Panoramica

Il recettore per peptidi formilati 2 (FPR2; gene *Fpr2*) è un recettore murino accoppiato a proteine G (GPCR) che riconosce una varietà di ligandi chemiotattici e pro-risolutivi, accoppiandosi alla segnalazione mediata da Gi per regolare la chemiotassi, l’adesione e l’attivazione dei leucociti. L’attivazione di FPR2 modula vie di segnalazione a valle, tra cui PI3K/AKT, MAPK/ERK, la mobilizzazione del calcio guidata da PLCβ e la segnalazione associata a β-arrestina, influenzando il rilascio di mediatori infiammatori e le risposte delle specie reattive dell’ossigeno. Attraverso questi programmi, FPR2 contribuisce alla sorveglianza immunitaria innata e ai processi di risoluzione dell’infiammazione, con un ruolo documentato nel danno tissutale infiammatorio, nell’infiammazione associata alle infezioni e nella patologia guidata dal sistema immunitario. La sua segnalazione dipendente dal contesto lo rende un bersaglio utile per chiarire come gli input dei GPCR riprogrammino il comportamento delle cellule mieloidi in diversi microambienti infiammatori.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO FPR2 (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Fpr2 in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Fpr2 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Fpr2 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina FPR2.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Fpr2 per lo studio della segnalazione di FPR2, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni Fpr2 critici per la funzione di FPR2
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Fpr2 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal FPR2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal FPR2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Fpr2. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal FPR2 Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR FPR2 (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Fpr2 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Fpr2 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.