FGF-7 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-401243

Panoramica

FGF7 codifica il fattore di crescita dei fibroblasti 7 (FGF-7, noto anche come fattore di crescita dei cheratinociti), un ligando paracrino prodotto in gran parte da cellule mesenchimali che segnala principalmente attraverso FGFR2b su bersagli epiteliali. Questo asse di segnalazione regola proliferazione, migrazione e differenziazione dell’epitelio e contribuisce alla riparazione dei tessuti e al mantenimento della barriera tramite le vie a valle MAPK/ERK, PI3K/AKT e altre vie correlate ai fattori di crescita. Una segnalazione FGF7–FGFR2b deregolata è stata implicata nell’iperplasia epiteliale, nel rimodellamento associato alla fibrosi e nelle interazioni tumore–stroma che influenzano la crescita e l’invasione dei carcinomi. Come fattore modello nel crosstalk epitelio–mesenchima, FGF-7 è spesso studiato in contesti quali la biologia della cicatrizzazione delle ferite, l’omeostasi dell’epitelio delle vie aeree e del tratto gastrointestinale e la segnalazione guidata dal microambiente.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO FGF-7 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene FGF7 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del FGF7 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto FGF7 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina FGF-7.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di FGF7 per lo studio della segnalazione di FGF-7, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni FGF7 critici per la funzione di FGF-7
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di FGF7 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal FGF-7 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal FGF-7 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus FGF7. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal FGF-7 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR FGF-7 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia FGF7 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio FGF7 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.