Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Fer Plasmide Double Nickase (h): sc-402734-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Fer Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Fer Double Nickase Plasmid (h) e il Fer Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira FER. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Fer Antibody (C-1): sc-390484
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Fer Plasmide Double Nickase (h) | sc-402734-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Fer Plasmide Double Nickase (h2) | sc-402734-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene umano **FER** codifica **Fer**, una tirosin-chinasi proteica citoplasmatica non recettoriale della famiglia **FES/FER**, che integra segnali provenienti dalle tirosin-chinasi recettoriali e dai complessi di adesione cellulare. Fer contribuisce al controllo, dipendente dalla fosforilazione, del rimodellamento del citoscheletro, della stabilità delle giunzioni mediate da caderine e di vie responsive ai fattori di crescita come la segnalazione **PI3K–AKT** e **MAPK**. Attraverso questi processi, l’attività di FER è stata collegata alla regolazione della migrazione cellulare, della proliferazione e delle risposte allo stress, risultando quindi rilevante per studi sulla segnalazione oncogenica e sui fenotipi metastatici. Alterazioni dell’espressione di FER o dei suoi output di segnalazione sono state associate a contesti di progressione tumorale e a reti di segnalazione infiammatoria in molteplici sistemi modello.
Fer Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus FER nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di FER. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di FER. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con FER interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.