Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
FAM148C Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-414279
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- FAM148C Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico FAM148C, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: FAM148C Antibody (F-10): sc-515089
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
FAM148C Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h) | sc-414279 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
C2CD4C (FAM148C) codifica una proteina contenente un dominio C2 implicata nella segnalazione associata alle membrane dipendente dal calcio e nella regolazione delle interazioni proteina–proteina a livello delle membrane intracellulari. Annotazioni funzionali emergenti collegano FAM148C a vie che coordinano il traffico vescicolare, la dinamica del citoscheletro e programmi trascrizionali responsivi agli stimoli che influenzano la crescita cellulare e l’omeostasi metabolica. Studi genetici hanno associato variazioni nel locus C2CD4C a tratti glicemici e al rischio di diabete di tipo 2, sostenendo l’interesse a indagarne i ruoli nella funzione delle isole pancreatiche e in reti più ampie di segnalazione endocrina. Queste caratteristiche rendono FAM148C un bersaglio utile per studi meccanicistici sull’integrazione dei segnali e sulle relazioni genotipo–fenotipo in modelli cellulari umani.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO FAM148C (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene C2CD4C in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del C2CD4C insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto C2CD4C a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina FAM148C.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di C2CD4C per lo studio della segnalazione di FAM148C, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni C2CD4C critici per la funzione di FAM148C
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di C2CD4C per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal FAM148C CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal FAM148C CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus C2CD4C. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal FAM148C Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR FAM148C (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia C2CD4C per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio C2CD4C definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.