Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
CYPOR Plasmide Double Nickase (m): sc-422345-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- CYPOR Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il CYPOR Double Nickase Plasmid (m) e il CYPOR Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Por. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: CYPOR Antibody (F-10): sc-25270
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
CYPOR Plasmide Double Nickase (m) | sc-422345-NIC | 20 µg | $410.00 |
Il gene Por del topo codifica la citocromo P450 ossidoreduttasi (CYPOR), una flavoproteina che trasferisce elettroni dal NADPH agli enzimi citocromo P450 microsomiali e ad altri partner redox. La CYPOR è centrale nel metabolismo ossidativo, supportando vie coinvolte nell’eliminazione degli xenobiotici, nella biosintesi di steroidi e lipidi e nell’omeostasi redox all’interno del reticolo endoplasmatico. Alterazioni dell’attività di POR/CYPOR possono perturbare le reti metaboliche dipendenti dai P450, influenzando la suscettibilità alle interazioni farmaco–gene, le risposte allo stress ossidativo e fenotipi legati al sistema endocrino. Por è quindi ampiamente studiato nel metabolismo epatico, nella biologia dello sviluppo e nella regolazione a livello di sistema delle vie di detossificazione.
CYPOR Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Por nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Por. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Por. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Por interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.