Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
CLK2 Plasmide Double Nickase (h): sc-403326-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- CLK2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il CLK2 Double Nickase Plasmid (h) e il CLK2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira CLK2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: CLK2 Antibody (F-4): sc-393909
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
CLK2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-403326-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CLK2 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-403326-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La chinasi 2 simile a CDC (CLK2) è una chinasi a doppia specificità serina/treonina che fosforila i fattori di splicing SR, collegando la trascrizione all’elaborazione del pre‑mRNA e regolando le decisioni di splicing alternativo. L’attività di CLK2 contribuisce a controllare la dinamica dello spliceosoma e influenza la progressione del ciclo cellulare e i programmi trascrizionali responsivi allo stress. Attraverso questi ruoli, CLK2 modula gli output di espressione genica legati a proliferazione, differenziamento e adattamento metabolico. Un’espressione o una segnalazione di CLK2 disregolate sono state associate a pattern di splicing anomali osservati in molteplici contesti patologici, inclusi il cancro e altri disturbi caratterizzati da un’alterazione dell’elaborazione dell’RNA.
CLK2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus CLK2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di CLK2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di CLK2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con CLK2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.