Cdx1 Plasmide Double Nickase (h): sc-402522-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Cdx1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Cdx1 Double Nickase Plasmid (h) e il Cdx1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira CDX1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Cdx1 Antibody (D-4): sc-515146
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Cdx1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-402522-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Cdx1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-402522-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CDX1 codifica il fattore di trascrizione homeobox di tipo caudal Cdx1, un regolatore che si lega al DNA in modo sequenza-specifico e contribuisce alla definizione dell’asse antero-posteriore e alla differenziazione dell’epitelio intestinale. Cdx1 integra input di segnalazione dello sviluppo, inclusi i programmi responsivi a Wnt/β-catenina e all’acido retinoico, per plasmare reti trascrizionali specifiche di linea e l’identità regionale. Nei tessuti adulti, CDX1 aiuta a mantenere l’omeostasi epiteliale e influenza l’equilibrio tra proliferazione e differenziamento attraverso il controllo trascrizionale di geni bersaglio a valle. Un’espressione deregolata di CDX1 e un’attività alterata della famiglia CDX sono state associate alla metaplasia intestinale e alla biologia dei tumori del colon-retto, rendendolo un locus utile per studi meccanicistici sulla trasformazione e sulla differenziazione epiteliale.
Cdx1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus CDX1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di CDX1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di CDX1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con CDX1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.