Plasmide CRISPR/Cas9 KO CD79B (m): sc-421055

Présentation

Cd79b code pour CD79B (Igβ), une sous-unité de signalisation essentielle du complexe du récepteur des antigènes des cellules B (BCR), qui s’associe à CD79A afin de relier l’engagement des immunoglobulines de surface à la signalisation intracellulaire. Via son motif ITAM, CD79B coordonne le recrutement de kinases et de protéines adaptatrices pour propager des voies dépendantes du BCR qui régulent le développement, l’activation, le traitement de l’antigène et la survie des cellules B. La fonction de CD79B est étroitement liée à des cascades en aval, notamment la signalisation médiée par SYK/BTK ainsi que l’activation des voies NF-κB et MAPK, contribuant à façonner les réponses immunitaires et la tolérance. Une signalisation du BCR dérégulée et une expression ou une fonction altérée de CD79B sont fréquemment étudiées dans le cadre des mécanismes des malignités des cellules B et des dysrégulations immunitaires, faisant de Cd79b un locus utile pour explorer les réseaux de signalisation des cellules B.

Le plasmide CRISPR/Cas9 KO CD79B (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Cd79b dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Cd79b, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.

La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Cd79b à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine CD79B.

Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Cd79b pour l'étude de la signalisation de CD79B, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.

Caractéristiques principales

• sgRNA ciblant le ou les exons de Cd79b essentiels à la fonction de CD79B
  Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
  Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
  Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Cd79b pour améliorer l'efficacité du knock-out
  Compatible avec l'administration par transfection

Variantes de conception

CRISPR +/- HDR

• Les gRNA codés par le CD79B plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le CD79B plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Cd79b. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
  Les constructions donneuses HDR codées par le CD79B plasmide HDR (m) et le CD79B (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Cd79b pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Cd79b définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.