Plasmide CRISPR/Cas9 KO CD2AP (m): sc-419542
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- CD2AP Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique CD2AP, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO CD2AP (m) | sc-419542 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Cd2ap code la protéine associée à CD2 (CD2AP), une protéine adaptatrice et d’échafaudage qui coordonne le remodelage du cytosquelette d’actine avec le trafic membranaire au niveau de jonctions cellulaires spécialisées. Dans les cellules de souris, CD2AP participe à l’endocytose et au tri vésiculaire via des interactions avec le diaphragme de fente et la machinerie endocytaire, contribuant ainsi à la polarité cellulaire et aux fonctions de barrière. Les réseaux liés à CD2AP recoupent des voies de signalisation qui régulent la dynamique d’adhésion et l’organisation du cytosquelette, ce qui en fait un nœud pertinent pour étudier la stabilité des jonctions et le renouvellement des récepteurs. Des perturbations génétiques de Cd2ap ont été associées à des défauts de la barrière de filtration glomérulaire et à des phénotypes rénaux protéinuriques ; ce gène est également utilisé pour explorer l’organisation de la synapse immunologique et l’intégrité épithéliale dans des modèles pertinents pour les maladies.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO CD2AP (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Cd2ap dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Cd2ap, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Cd2ap à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine CD2AP.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Cd2ap pour l'étude de la signalisation de CD2AP, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Cd2ap essentiels à la fonction de CD2AP
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Cd2ap pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le CD2AP plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le CD2AP plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Cd2ap. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le CD2AP plasmide HDR (m) et le CD2AP (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Cd2ap pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Cd2ap définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.