c-Jun Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h2): sc-400077-KO-2

Panoramica

JUN codifica c-Jun, un componente centrale del complesso del fattore di trascrizione AP-1, che integra segnali extracellulari in programmi di espressione genica dipendenti dal contesto. c-Jun è rapidamente indotto da segnali di stress e mitogenici ed è regolato dalla fosforilazione a valle delle cascate MAPK/JNK, modulando risposte trascrizionali che controllano proliferazione, differenziamento, apoptosi e segnalazione infiammatoria. Attraverso la regolazione AP-1–dipendente di citochine, enzimi di rimodellamento della matrice e regolatori del ciclo cellulare, c-Jun collega la trasduzione del segnale a cambiamenti nell’accessibilità della cromatina e nell’output trascrizionale. Un’attività deregolarizzata di JUN/AP-1 è stata implicata nella trasformazione oncogena, nell’invasione tumorale e in processi immunitari e neuroinfiammatori, rendendolo un nodo chiave per studi meccanicistici in modelli di malattie umane.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO c-Jun (h2) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene JUN in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del JUN insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto JUN a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina c-Jun.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di JUN per lo studio della segnalazione di c-Jun, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni JUN critici per la funzione di c-Jun
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di JUN per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal c-Jun CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal c-Jun CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus JUN. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal c-Jun Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR c-Jun (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia JUN per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio JUN definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.