C/EBP beta Plasmide Double Nickase (h): sc-400125-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- C/EBP beta Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il C/EBP beta Double Nickase Plasmid (h) e il C/EBP beta Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira CEBPB. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: C/EBP beta Antibody (H-7): sc-7962
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
C/EBP beta Plasmide Double Nickase (h) | sc-400125-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
C/EBP beta Plasmide Double Nickase (h2) | sc-400125-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CEBPB codifica C/EBP beta, un fattore di trascrizione di tipo basic leucine zipper (bZIP) che regola la determinazione di linea e l’espressione genica risposta allo stress nelle cellule ematopoietiche e mesenchimali. Integra i segnali di citochine e fattori di crescita a valle di vie quali JAK/STAT, MAPK e NF-κB per controllare programmi legati a infiammazione, risposta di fase acuta, adipogenesi e attivazione dei macrofagi. C/EBP beta coordina inoltre le decisioni sul ciclo cellulare e sulla sopravvivenza tramite reti trascrizionali dipendenti dal contesto, inclusa la cooperazione con AP-1 e con altri membri della famiglia C/EBP. Un’attività deregolata di CEBPB è stata associata a segnalazione infiammatoria aberrante, stati di differenziamento alterati e fenotipi trascrizionali pro-tumorali in molteplici modelli rilevanti per il cancro.
C/EBP beta Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus CEBPB nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di CEBPB. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di CEBPB. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con CEBPB interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.