Date published: 2026-9-29

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Plasmide Double Nickase (m) BMPR-IB: sc-419351-NIC

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Fiches techniques
  • Espèces cibles: mouse
  • 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
  • Le Plasmide Double Nickase (m) BMPR-IB correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
  • Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
  • L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
  • Le plasmide BMPR-IB Double Nickase (m) et le plasmide BMPR-IB Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Bmpr1b. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
  • Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: BMPR-IB Antibody (C-8): sc-515886
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    Plasmide Double Nickase (m) BMPR-IB

    sc-419351-NIC
    20 µg
    $410.00

    Bmpr1b code le récepteur murin de la protéine morphogénétique osseuse de type IB (BMPR-IB), un récepteur kinase sérine/thréonine qui se lie aux ligands BMP et initie la signalisation canonique SMAD1/5/8 ainsi que des voies MAPK non canoniques. BMPR-IB régule la spécification des lignages, la morphogenèse tissulaire et l’homéostasie en intégrant les signaux BMP extracellulaires dans des programmes transcriptionnels contrôlant la prolifération et la différenciation. En biologie du développement et de la reproduction, BMPR-IB est impliqué dans la mise en place du squelette et la folliculogénèse ovarienne, et une altération de la signalisation BMP/BMPR-IB a été associée à une différenciation et un remodelage dérégulés dans de multiples systèmes organiques. En tant que nœud de voie, BMPR-IB est fréquemment étudié pour son rôle dans le dialogue (crosstalk) avec la signalisation de la famille TGF-β et le contrôle, dépendant du contexte, des décisions de destinée cellulaire.

    BMPR-IB Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Bmpr1b dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Bmpr1b. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Bmpr1b. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

    Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Bmpr1b.

    Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.