Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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BACE2 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-403147
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- BACE2 Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico BACE2, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: BACE2 Antibody (H-3): sc-271212
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
BACE2 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h) | sc-403147 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
BACE2 (enzima 2 che scinde l’APP al sito beta, beta-site APP cleaving enzyme 2) è una proteasi aspartilica transmembrana di tipo I della famiglia della pepsina, localizzata in compartimenti secretori ed endocitici, e contribuisce alla proteolisi regolata delle proteine di membrana. Partecipa a vie legate al processamento della proteina precursore dell’amiloide e, più in generale, alla proteostasi nel sistema Golgi–endosoma–lisosoma, influenzando il traffico e il turnover delle proteine substrato. L’attività di BACE2 è stata studiata nel contesto della neurobiologia e della regolazione metabolica, inclusi la funzione delle isole pancreatiche e le reti di segnalazione infiammatoria. Un’alterata espressione di BACE2 o una disregolazione dell’attività proteasica è stata associata a fenotipi rilevanti per la malattia nella neurodegenerazione e in comportamenti cellulari legati al cancro, supportandone l’impiego come bersaglio meccanicistico nella genomica funzionale.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO BACE2 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene BACE2 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del BACE2 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto BACE2 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina BACE2.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di BACE2 per lo studio della segnalazione di BACE2, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni BACE2 critici per la funzione di BACE2
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di BACE2 per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal BACE2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal BACE2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus BACE2. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal BACE2 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR BACE2 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia BACE2 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio BACE2 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.