AT2/Angiotensin Receptor 2/AGTR2 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-419050

Panoramica

Agtr2 codifica il recettore dell’angiotensina II di tipo 2 (AT2/AGTR2), un GPCR a sette domini transmembrana appartenente al sistema renina–angiotensina che modula le risposte cellulari all’angiotensina II. Nei tessuti murini, la segnalazione di AGTR2 è comunemente associata alla regolazione del tono vascolare e del rimodellamento tissutale e può influenzare vie di secondi messaggeri, tra cui la segnalazione ossido nitrico/cGMP, l’attività delle fosfatasi e programmi dipendenti da MAPK che modellano proliferazione, apoptosi e differenziamento. Il recettore è studiato in contesti endoteliali, di muscolo liscio, neuronali e renali, dove interagisce con processi infiammatori e fibrotici e controbilancia gli effetti mediati da AT1. Una segnalazione dell’angiotensina deregolata che coinvolge AGTR2 è stata associata alla biologia di malattie cardiovascolari, renali e neuroinfiammatorie, rendendolo rilevante per studi meccanicistici sul rimodellamento e sulle vie di risposta allo stress.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO AT2/Angiotensin Receptor 2/AGTR2 (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Agtr2 in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Agtr2 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Agtr2 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina AT2/Angiotensin Receptor 2/AGTR2.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Agtr2 per lo studio della segnalazione di AT2/Angiotensin Receptor 2/AGTR2, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni Agtr2 critici per la funzione di AT2/Angiotensin Receptor 2/AGTR2
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Agtr2 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal AT2/Angiotensin Receptor 2/AGTR2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal AT2/Angiotensin Receptor 2/AGTR2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Agtr2. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal AT2/Angiotensin Receptor 2/AGTR2 Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR AT2/Angiotensin Receptor 2/AGTR2 (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Agtr2 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Agtr2 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.