ARMCX3 Double Nickase Plasmid (h): sc-409945-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das ARMCX3 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- ARMCX3 Double-Nickase-Plasmid (h) und ARMCX3 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf ARMCX3 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: ARMCX3: sc-393752
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
ARMCX3 Double Nickase Plasmid (h) | sc-409945-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ARMCX3 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-409945-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ARMCX3 (Armadillo-Repeat-enthaltend, X‑chromosomal 3) kodiert ein mit der äußeren Mitochondrienmembran assoziiertes Protein, das an der neuronalen Entwicklung und der Homöostase von Organellen beteiligt ist. ARMCX3 wirkt an der Regulation des mitochondrialen Transports, der Dynamik und der Qualitätskontrolle mit – Prozesse, die die zelluläre Bioenergetik und Stresssignalwege beeinflussen. Über diese Funktionen ist ARMCX3 für Signalwege relevant, die die mitochondriale Verteilung mit Überlebens- und Differenzierungsprogrammen verknüpfen, darunter auch Kontexte, in denen ein verändertes Mitochondrienverhalten zu neurodegenerativen und krebsassoziierten Phänotypen beiträgt. Eine Dysregulation der ARMCX3-Expression oder -Funktion wurde mit Veränderungen in Proliferation, Apoptoseanfälligkeit und migrationsbezogener Signalgebung in Verbindung gebracht, was ARMCX3 zu einem nützlichen Ziel für mechanistische Studien der mitochondrialen Kontrolle in humanen Zellen macht.
ARMCX3 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des ARMCX3-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von ARMCX3 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die ARMCX3-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit ARMCX3-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.