apoC-III Plasmide Double Nickase (m): sc-419165-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- apoC-III Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il apoC-III Double Nickase Plasmid (m) e il apoC-III Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Apoc3. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
apoC-III Plasmide Double Nickase (m) | sc-419165-NIC | 20 µg | $410.00 |
Il gene murino Apoc3 codifica l’apolipoproteina C-III (apoC-III), un’apolipoproteina secreta che si associa alle lipoproteine ricche di trigliceridi e modula la gestione dei lipidi nel plasma. apoC-III influisce sull’idrolisi dei trigliceridi dipendente dalla lipoprotein lipasi e sulla clearance epatica delle particelle residue, collegandosi così al trasporto dei lipidi, al metabolismo energetico e alla regolazione endocrina delle risposte tra digiuno e alimentazione. Un’alterata espressione di Apoc3 modifica l’omeostasi sistemica dei trigliceridi ed è spesso studiata nel contesto di fenotipi metabolici associati alla dislipidemia, inclusi la resistenza all’insulina e processi legati alla steatosi epatica. Nel topo, Apoc3 è anche utilizzato come locus modello per analizzare le vie secretorie degli epatociti, il rimodellamento delle lipoproteine e le interazioni gene–dieta.
apoC-III Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Apoc3 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Apoc3. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Apoc3. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Apoc3 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.