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AP-2α双切口酶质粒(h) | sc-400935-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
AP-2α双切口酶质粒(h2) | sc-400935-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TFAP2A 编码转录因子 AP-2α,这是一种序列特异性的 DNA 结合蛋白,在神经嵴发育、表皮分化以及颅面形态发生过程中协调基因表达程序。AP-2α 调控与细胞周期进程、细胞-细胞黏附以及上皮谱系命运决定相关的启动子和增强子,并整合来自 WNT、视黄酸应答网络等发育信号通路的调控输入。TFAP2A 活性失调与先天性发育异常以及癌症中的转录状态改变有关,在这些情境下,依赖 AP-2α 的调控回路发生变化可影响细胞增殖与分化。这些特性使 TFAP2A 成为在人类细胞模型中解析谱系选择转录调控与上皮生物学的有用基因位点。
AP-2α 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 TFAP2A 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对TFAP2A内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏TFAP2A的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了TFAP2A基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。