ANKRD37 Plasmide Double Nickase (h): sc-410438-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- ANKRD37 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il ANKRD37 Double Nickase Plasmid (h) e il ANKRD37 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira ANKRD37. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
ANKRD37 Plasmide Double Nickase (h) | sc-410438-NIC | 20 µg | $410.00 |
ANKRD37 (ankyrin repeat domain 37) codifica una proteina responsiva all’ipossia, la cui espressione è fortemente regolata dalla segnalazione mediata da HIF, collegando il rilevamento dell’ossigeno all’adattamento trascrizionale. È comunemente utilizzato come readout molecolare dell’attività della via HIF-1 e partecipa a programmi cellulari che rimodellano metabolismo, sopravvivenza e risposte allo stress in condizioni di bassa disponibilità di ossigeno. Un’alterata espressione di ANKRD37 è stata riportata in diversi microambienti arricchiti di ipossia, inclusi i tumori solidi e contesti ischemici o infiammatori, dove può riflettere cambiamenti nelle reti di regolazione genica dipendenti dall’ossigeno. Queste caratteristiche rendono ANKRD37 rilevante per lo studio dei programmi trascrizionali guidati dall’ipossia, del crosstalk tra vie di segnalazione e di fenotipi dipendenti dal contesto nelle cellule umane.
ANKRD37 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus ANKRD37 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di ANKRD37. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di ANKRD37. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con ANKRD37 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.