Plasmide Double Nickase (h) ANKRD37: sc-410438-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) ANKRD37 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ANKRD37 Double Nickase (h) et le plasmide ANKRD37 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ANKRD37. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
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Plasmide Double Nickase (h) ANKRD37 | sc-410438-NIC | 20 µg | $410.00 |
ANKRD37 (domaine à répétitions ankyrine 37) code une protéine sensible à l’hypoxie dont l’expression est fortement régulée par la signalisation HIF, reliant la détection de l’oxygène à l’adaptation transcriptionnelle. Il est couramment utilisé comme marqueur moléculaire de l’activité de la voie HIF‑1 et participe à des programmes cellulaires qui remanient le métabolisme, la survie et les réponses au stress en conditions de faible teneur en oxygène. Une expression altérée d’ANKRD37 a été rapportée dans divers microenvironnements riches en hypoxie, notamment en biologie des tumeurs solides ainsi que dans des contextes ischémiques ou inflammatoires, où elle peut refléter des modifications des réseaux de régulation génique dépendants de l’oxygène. Ces caractéristiques font d’ANKRD37 une cible pertinente pour étudier les programmes transcriptionnels induits par l’hypoxie, les interactions entre voies de signalisation et des phénotypes dépendants du contexte dans les cellules humaines.
ANKRD37 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ANKRD37 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ANKRD37. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ANKRD37. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ANKRD37.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.