Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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AdSS1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419030
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- AdSS1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico AdSS1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: AdSS1 Anticuerpo (G-9): sc-166401
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
AdSS1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419030 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
El gen murino **Adssl1** codifica **AdSS1**, una enzima de la familia de las adenilosuccinato sintasas que favorece la biosíntesis *de novo* de purinas al catalizar la formación de adenilosuccinato, un paso clave en la producción de AMP. A través de su contribución a la homeostasis de nucleótidos, AdSS1 ayuda a sostener la síntesis de ADN/ARN, la carga energética y la capacidad proliferativa, vinculándose así a programas metabólicos centrales que acoplan la función mitocondrial y el crecimiento celular. La alteración del metabolismo de las purinas puede desorganizar las vías de replicación y de respuesta al estrés, y se asocia con frecuencia con disfunción metabólica y un control alterado del ciclo celular. Como parálogo enriquecido en músculo dentro de esta vía, **Adssl1** es relevante para estudiar la regulación específica por tejido del flujo de nucleótidos y sus efectos posteriores sobre la bioenergética y la fisiología celular.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO AdSS1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Adssl1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Adssl1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Adssl1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína AdSS1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Adssl1 para la investigación de la señalización de AdSS1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Adssl1 críticos para la función de AdSS1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Adssl1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido AdSS1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido AdSS1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Adssl1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR AdSS1 (m) y el plásmido HDR AdSS1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Adssl1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Adssl1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.