Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Plasmide Double Nickase (m) αENaC: sc-422825-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) αENaC correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide αENaC Double Nickase (m) et le plasmide αENaC Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Scnn1a. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) αENaC | sc-422825-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) αENaC | sc-422825-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Scnn1a code la sous-unité alpha du canal sodique épithélial de la souris (αENaC), un composant central formant le pore d’ENaC qui assure l’absorption de Na⁺ sensible à l’amiloride à travers les épithéliums. Le flux de sodium dépendant d’αENaC contribue au transport ionique transépithélial, aux mouvements osmotiques d’eau et à la régulation du potentiel de membrane dans le rein, les voies aériennes et d’autres tissus épithéliaux. L’activité d’ENaC est étroitement contrôlée par le traitement protéolytique et le renouvellement dépendant de l’ubiquitine, notamment via la modulation par NEDD4L et la signalisation SGK1 en réponse à des hormones telles que l’aldostérone. Une fonction dérégulée d’ENaC est associée à des altérations de l’homéostasie du sel et des fluides et fait l’objet de nombreuses études dans des modèles d’hydratation de la surface des voies aériennes pulmonaires et de gestion rénale du sodium.
αENaC Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Scnn1a dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Scnn1a. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Scnn1a. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Scnn1a.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.