ZKSCAN1 Plasmide Double Nickase (m): sc-428933-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- ZKSCAN1 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il ZKSCAN1 Double Nickase Plasmid (m) e il ZKSCAN1 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Zkscan1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
ZKSCAN1 Plasmide Double Nickase (m) | sc-428933-NIC | 20 µg | $410.00 |
Zkscan1 codifica ZKSCAN1, un fattore di trascrizione a dita di zinco C2H2 contenente domini KRAB e SCAN, implicato nella regolazione genica sequenza-specifica e nel controllo trascrizionale associato alla cromatina. Attraverso il reclutamento, mediato dal dominio KRAB, di complessi corepressori, ZKSCAN1 è collegato a programmi di repressione epigenetica che influenzano il mantenimento dello stato cellulare, la proliferazione e reti trascrizionali responsivi allo stress. Alterazioni dell’espressione o dell’attività di ZKSCAN1 sono state studiate in contesti di trascrizione deregolata e di segnalazione oncogenica, in cui tali perturbazioni possono incidere su vie che controllano la progressione del ciclo cellulare e la differenziazione. Nei modelli murini, Zkscan1 rappresenta un locus maneggevole per analizzare come i regolatori KRAB-ZFP plasmino i programmi di espressione genica nello sviluppo e in fenotipi cellulari rilevanti per la malattia.
ZKSCAN1 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Zkscan1 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Zkscan1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Zkscan1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Zkscan1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.