ZEB1 Plasmide Double Nickase (m): sc-423302-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- ZEB1 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il ZEB1 Double Nickase Plasmid (m) e il ZEB1 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Zeb1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
ZEB1 Plasmide Double Nickase (m) | sc-423302-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ZEB1 Plasmide Double Nickase (m2) | sc-423302-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Zeb1 codifica il fattore di trascrizione zinc finger E-box binding homeobox 1 (ZEB1), un fattore di trascrizione specifico per la sequenza che si lega ai motivi E-box per coordinare la transizione epitelio–mesenchimale (EMT), la polarità cellulare e la plasticità di linea. Nei sistemi murini, ZEB1 integra la segnalazione TGF-β/SMAD e regola in modo incrociato reti di microRNA come la famiglia miR-200, rimodellando programmi trascrizionali che controllano adesione, migrazione e differenziamento. ZEB1 modula la cromatina e la trascrizione attraverso interazioni con corepressori, tra cui CtBP e altri regolatori epigenetici, collegando segnali dello sviluppo a stati stabili di espressione genica. Un’attività di ZEB1 deregolata è associata a programmi aberranti di tipo EMT e a un differenziamento alterato in modelli rilevanti per la patologia, rendendolo un bersaglio comune per studi meccanicistici su invasione, fibrosi e vie di progressione tumorale.
ZEB1 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Zeb1 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Zeb1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Zeb1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Zeb1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.