ZEB Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400201-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ZEB1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ZEB1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase ZEB1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ZEB1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ZEB1 Anticorpo (416A7H10): sc-81428
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ZEB Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400201-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ZEB1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400201-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ZEB1 codifica a proteína homeobox de ligação ao E-box com dedos de zinco ZEB, um regulador transcricional que se liga a motivos semelhantes a E-box para modular programas de expressão gênica que controlam a transição epitélio–mesênquima, a polaridade celular e a diferenciação. Por meio de interações com correpressores como CtBP e fatores de remodelamento de cromatina, ZEB influencia vias como a sinalização TGF-β/SMAD e redes transcricionais que governam a adesão e a remodelação do citoesqueleto. A atividade desregulada de ZEB1 tem sido associada a alterações no padrão de desenvolvimento e na plasticidade epitelial, e é frequentemente estudada em contextos de invasão de células tumorais, fenótipos associados à metástase e mecanismos de resistência a terapias. Além disso, o controle transcricional dependente de ZEB1 contribui para estados semelhantes aos de células-tronco e para mudanças na expressão de genes relacionados ao sistema imune em múltiplos modelos de doença.
ZEB1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ZEB1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ZEB1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ZEB1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ZEB1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.