ZBP1 Plasmide Double Nickase (h): sc-406434-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- ZBP1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il ZBP1 Double Nickase Plasmid (h) e il ZBP1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira ZBP1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: ZBP1 Antibody (H-9): sc-271483
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
ZBP1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-406434-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ZBP1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-406434-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ZBP1 (proteina legante il DNA-Z 1; nota anche come DAI) è un sensore dell’immunità innata che riconosce gli acidi nucleici in conformazione Z e collega il rilevamento degli acidi nucleici all’attivazione di programmi infiammatori e di morte cellulare. Attraverso interazioni dipendenti da RHIM con RIPK3 e altri partner di segnalazione, ZBP1 può promuovere risposte necroptotiche e apoptotiche e modulare l’espressione di geni stimolati dall’interferone a valle del riconoscimento dei patogeni. È integrata nelle vie di difesa antivirale e contribuisce alla regolazione della segnalazione di NF-κB e dell’interferone di tipo I in risposta a infezione o a stress da acidi nucleici endogeni. Un’attività deregolata di ZBP1 è stata collegata a infiammazione aberrante e a patologie immuno-mediate, rendendola rilevante per lo studio dei meccanismi delle malattie infiammatorie e delle interazioni ospite–patogeno.
ZBP1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus ZBP1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di ZBP1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di ZBP1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con ZBP1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.