Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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YY1 Plasmide Double Nickase (h): sc-400395-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- YY1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il YY1 Double Nickase Plasmid (h) e il YY1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira YY1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: YY1 Antibody (H-10): sc-7341
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
YY1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-400395-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
YY1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-400395-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
YY1 (Yin Yang 1) codifica un fattore di trascrizione multifunzionale a dita di zinco che può agire sia da attivatore sia da repressore trascrizionale, coordinando programmi di espressione genica dipendenti dal contesto. YY1 partecipa al rimodellamento della cromatina e alla regolazione epigenetica attraverso interazioni con complessi associati a Polycomb ed enzimi che modificano gli istoni, influenzando l'attività di promotori/enhancer e l'organizzazione 3D del genoma. Contribuisce a processi cellulari fondamentali, tra cui la progressione del ciclo cellulare, le risposte al danno al DNA, la differenziazione e il controllo del metabolismo. Un'attività di YY1 deregolata è stata collegata a reti trascrizionali alterate osservate in diversi tumori e disturbi dello sviluppo, rendendolo un nodo ampiamente utilizzato per studiare i meccanismi di controllo della trascrizione.
YY1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus YY1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di YY1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di YY1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con YY1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.