WSB1 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-429733-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- WSB1O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase WSB1 (m) e o Plasmídeo Double Nickase WSB1 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Wsb1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:WSB1 Anticorpo (A-10): sc-393483
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
WSB1 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-429733-NIC | 20 µg | $410.00 |
Wsb1 codifica a proteína murina 1 contendo repetições WD e caixa SOCS (WSB1), um componente adaptador de complexos de ligase E3 de ubiquitina do tipo ECS, que ajuda a acoplar o reconhecimento de substratos à proteostase dependente de ubiquitina. Por meio da modulação do turnover proteico, a WSB1 tem sido associada à regulação de respostas de sinalização, como vias responsivas à hipóxia e à adaptação ao estresse celular, com efeitos a jusante sobre programas de proliferação e diferenciação. Alterações na atividade da WSB1 têm sido relacionadas na literatura a redes de ubiquitinação desreguladas que se cruzam com a sinalização oncogênica e a homeostase tecidual. Essas propriedades tornam Wsb1 um alvo útil para estudar, em sistemas de modelos murinos, como a via da ubiquitina controla a transdução de sinais e fenótipos relevantes para doenças.
WSB1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Wsb1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Wsb1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Wsb1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Wsb1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.