Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Vimentin Plasmide Double Nickase (m): sc-423676-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Vimentin Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Vimentin Double Nickase Plasmid (m) e il Vimentin Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Vim. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Vimentin Antibody (E-5): sc-373717
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Vimentin Plasmide Double Nickase (m) | sc-423676-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Vimentin Plasmide Double Nickase (m2) | sc-423676-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Vim codifica la vimentina, una proteina dei filamenti intermedi di tipo III che organizza la rete del citoscheletro e contribuisce a mantenere la forma cellulare, l’integrità meccanica e il posizionamento degli organelli negli stati cellulari mesenchimali e motili. La vimentina si rimodella dinamicamente durante la divisione, la migrazione e l’adesione cellulare, interagendo con actina e microtubuli e integrando vie di segnalazione coinvolte nella transizione epitelio-mesenchimale, nella riparazione delle ferite e nelle risposte infiammatorie. Nei modelli murini, un’espressione alterata della vimentina o cambiamenti nell’organizzazione dei suoi filamenti sono associati a modifiche nel traffico delle cellule immunitarie, nel rimodellamento legato alla fibrosi e in fenotipi correlati alla metastasi, rendendo Vim un nodo utile per studiare il crosstalk tra citoscheletro e segnali. La sua ampia espressione nei compartimenti stromali e immunitari supporta inoltre studi sull’architettura tissutale e sulla regolazione del microambiente.
Vimentin Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Vim nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Vim. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Vim. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Vim interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.