USP20 Plasmide Double Nickase (h): sc-406849-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- USP20 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il USP20 Double Nickase Plasmid (h) e il USP20 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira USP20. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
USP20 Plasmide Double Nickase (h) | sc-406849-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
USP20 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-406849-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
USP20 codifica la ubiquitin-specific peptidase 20 (USP20), un enzima deubiquitinante che modifica le catene di ubiquitina per modulare la stabilità proteica, il traffico intracellulare e la durata dei segnali. Invertendo l’ubiquitinazione su substrati selezionati, USP20 influenza la proteostasi e può modulare cascate di segnalazione legate a recettori e chinasi, incluse vie che convergono sulla segnalazione infiammatoria e sul controllo della crescita cellulare. L’attività di USP20 è stata collegata alla regolazione di nodi di segnalazione chiave come la β-catenina e HIF-1α, associandola a processi quali le risposte all’ipossia, i programmi trascrizionali e l’adattamento cellulare allo stress. Alterazioni nelle dinamiche di deubiquitinazione che coinvolgono USP20 sono studiate in contesti come la biologia tumorale, l’infiammazione vascolare e la disregolazione metabolica, in cui il rimodellamento della segnalazione dipendente dall’ubiquitina è una caratteristica comune.
USP20 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus USP20 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di USP20. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di USP20. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con USP20 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.