UQCRC1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-423625

Panoramica

Uqcrc1 codifica la proteina core 1 della ubiquinolo-citocromo c reduttasi (UQCRC1), un componente strutturale essenziale del complesso III della catena respiratoria mitocondriale (citocromo bc1) che favorisce il trasferimento di elettroni dall’ubiquinolo al citocromo c e contribuisce a sostenere la fosforilazione ossidativa. Influenzando il potenziale di membrana mitocondriale, la produzione di ATP e l’omeostasi delle specie reattive dell’ossigeno, UQCRC1 contribuisce al metabolismo energetico cellulare e ai programmi di segnalazione redox. L’alterazione della funzione del complesso III può compromettere l’adattamento metabolico e le risposte allo stress, processi spesso analizzati in modelli di neurodegenerazione, fenotipi cardiometabolici e biologia delle malattie proliferative. In quanto subunità core del complesso III, UQCRC1 è comunemente studiata in vie che collegano la disfunzione mitocondriale a una sensibilità alterata all’apoptosi, alla segnalazione ipossica e alla bioenergetica cellulare integrata.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO UQCRC1 (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Uqcrc1 in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Uqcrc1 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Uqcrc1 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina UQCRC1.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Uqcrc1 per lo studio della segnalazione di UQCRC1, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni Uqcrc1 critici per la funzione di UQCRC1
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Uqcrc1 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal UQCRC1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal UQCRC1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Uqcrc1. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal UQCRC1 Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR UQCRC1 (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Uqcrc1 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Uqcrc1 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.