UQCRC1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423625

Descripción general

Uqcrc1 codifica la proteína central 1 de la ubiquinol–citocromo c reductasa (UQCRC1), un componente estructural esencial del complejo III (citocromo bc1) de la cadena respiratoria mitocondrial, que facilita la transferencia de electrones desde el ubiquinol al citocromo c y ayuda a mantener la fosforilación oxidativa. Al influir en el potencial de membrana mitocondrial, la producción de ATP y la homeostasis de las especies reactivas de oxígeno, UQCRC1 contribuye al metabolismo energético celular y a los programas de señalización redox. La alteración de la función del complejo III puede desestabilizar la adaptación metabólica y las respuestas al estrés, procesos que se investigan con frecuencia en modelos de neurodegeneración, fenotipos cardiometabólicos y biología de enfermedades proliferativas. Como subunidad central del complejo III, UQCRC1 se estudia habitualmente en vías que vinculan la disfunción mitocondrial con cambios en la sensibilidad a la apoptosis, la señalización hipóxica y la bioenergética celular integrada.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO UQCRC1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Uqcrc1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Uqcrc1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Uqcrc1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína UQCRC1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Uqcrc1 para la investigación de la señalización de UQCRC1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Uqcrc1 críticos para la función de UQCRC1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Uqcrc1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido UQCRC1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido UQCRC1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Uqcrc1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR UQCRC1 (m) y el plásmido HDR UQCRC1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Uqcrc1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Uqcrc1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.