Plasmide Double Nickase (h) UBE2B: sc-404361-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) UBE2B correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide UBE2B Double Nickase (h) et le plasmide UBE2B Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant UBE2B. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) UBE2B | sc-404361-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) UBE2B | sc-404361-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
UBE2B code une enzyme E2 de conjugaison de l’ubiquitine (UbcH2) qui catalyse le transfert de l’ubiquitine de E1 vers les ligases E3, modulant l’ubiquitination des substrats et la protéostasie. Elle participe aux voies de réponse aux dommages de l’ADN et de maintien du génome, notamment via la régulation, dépendante de l’ubiquitine, de la signalisation de réparation et de processus associés à la chromatine. Dans la lignée germinale, UBE2B joue un rôle établi dans la spermatogenèse grâce au renouvellement des protéines médié par l’ubiquitine, reliant son activité à la progression méiotique et à des phénotypes associés à la fertilité. Une ubiquitination dérégulée impliquant des réseaux associés à UBE2B a été étudiée dans des contextes d’instabilité génomique et de réponses au stress altérées, pertinents pour la biologie du cancer et d’autres troubles prolifératifs.
UBE2B Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus UBE2B dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de UBE2B. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de UBE2B. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de UBE2B.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.