UBE2B Plasmide Double Nickase (h): sc-404361-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- UBE2B Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il UBE2B Double Nickase Plasmid (h) e il UBE2B Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira UBE2B. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
UBE2B Plasmide Double Nickase (h) | sc-404361-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
UBE2B Plasmide Double Nickase (h2) | sc-404361-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
UBE2B codifica un enzima E2 coniugante dell’ubiquitina (UbcH2) che catalizza il trasferimento dell’ubiquitina da E1 alle ligasi E3, determinando l’ubiquitinazione dei substrati e la proteostasi. Partecipa alle vie della risposta al danno del DNA e del mantenimento del genoma, inclusa la regolazione ubiquitina-dipendente della segnalazione di riparo e di processi associati alla cromatina. Nella linea germinale, UBE2B svolge ruoli consolidati nella spermatogenesi attraverso il turnover proteico mediato dall’ubiquitina, collegando la sua attività alla progressione meiotica e a fenotipi legati alla fertilità. Un’ubiquitinazione deregolata che coinvolge reti associate a UBE2B è stata studiata in contesti di instabilità genomica e risposte allo stress alterate, rilevanti per la biologia del cancro e di altri disturbi proliferativi.
UBE2B Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus UBE2B nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di UBE2B. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di UBE2B. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con UBE2B interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.