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TSPAN7慢病毒激活颗粒(h) | sc-404065-LAC | 200 µl | $455.00 |
TSPAN7(四跨膜蛋白-7)是一种四次跨膜的四跨膜蛋白家族成员,能够组织“四跨膜蛋白富集微域”,并调控细胞表面受体的运输、黏附以及与肌动蛋白相关的膜动力学。在神经和上皮等情境中,它通过与伙伴膜蛋白相互作用,促进细胞骨架重塑以及突触或细胞连接结构的构建,从而影响受体聚集与内吞之后的下游信号节点。TSPAN7表达或功能的改变与神经发育表型和突触功能障碍相关,这表明其在研究神经元连接性与可塑性方面具有重要意义。由于四跨膜蛋白主要通过调节膜区室化来发挥作用,而非作为经典酶类蛋白,TSPAN7常被用于研究其对通路串扰以及细胞状态转换的影响。
TSPAN7 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 TSPAN7 表达。
TSPAN7 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在TSPAN7转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性TSPAN7表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 TSPAN7 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。